%0 Journal Article
%T 基于噬菌体展示技术抗黄曲霉毒素B1单链抗体的筛选及其蛋白结构分析 *
%A 庞倩
%A 王佳
%A 王小红
%A 陈晶
%J -
%D 2018
%R 10.13523/j.cb.20181206
%X 黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)是一种毒性强、污染广的真菌毒素,建立高效、准确、快速的AFB1检测方法具有重要意义。利用噬菌粒-辅助噬菌体展示系统构建单链抗体(single chain variable fragment,scFv)文库,应用“淘选-洗脱”的策略,是筛选高亲和配体的常用方法之一。同时结合同源建模和分子对接等计算机辅助手段,分析得到抗体与抗原的结合位点与关键氨基酸,为在基因水平改造抗体提供基础。从AFB1-BSA免疫小鼠的脾细胞内扩增重链可变区和轻链可变区,将组合成的scFv片段插入噬菌粒pCANTAB5e中,构建了噬菌体展示单链抗体文库,以不同浓度的AFB1-OVA作为抗原,从文库中筛选到一株亲和力较好的抗AFB1单链抗体scFv,其亲和常数为8×10 5L/mol;根据同源建模和分子对接发现,与抗原AFB1结合时,scFv中Tyr33、Ser52和Tyr102起关键作用,分别以π-π共轭键、氢键和范德华力与AFB1结合
%K 黄曲霉毒素B1
%K 单链抗体
%K 噬菌粒-辅助噬菌体展示
%K 同源建模
%K 分子对接
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract6309.shtml