%0 Journal Article %T 聚乙二醇修饰重组溶葡球菌酶的初步研究 %A 万海同 %A 刘沐荣 %A 刘翔 %A 封小燕 %A 张加慧 %A 张钒 %A 万海同 %A 刘沐荣 %A 刘翔 %A 封小燕 %A 张加慧 %A 张钒 %A 王永 %J - %D 2013 %X 目的: 探讨聚乙二醇(PEG)修饰重组溶葡球菌酶(lysostaphin)的反应条件以及修饰后产物的纯化方法。方法: 采用超声波细胞粉碎机进行菌体破碎,阳离子交换层析、疏水层析进行蛋白纯化;在不同条件下,将活化的单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丙酸酯(mPEG-SPA)与纯化后的lysostaphin反应,以单个PEG-Lysostaphin的比例为指标,用SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS方法确定其在修饰产物中的所占比例;采用Sephacryl S-200分子筛凝胶层析法对修饰产物进行分离纯化。结果: mPEG-SPA修饰lysostaphin的反应条件为pH 8.0,温度4℃,lysostaphin与mPEG-SPA的质量比为1:5,反应时间2.0h;反应产物经一步Sephacryl S-200分子筛凝胶层析纯化后,初步实现分离。结论: 初步确定了聚乙二醇修饰lysostaphin的反应条件及修饰产物的纯化方法 %K 聚乙二醇 %K 重组溶葡球菌酶 %K 纯化 %K 单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺丙酸酯 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract487.shtml