%0 Journal Article
%T 新的肝细胞生长因子HPPCn的表达、纯化及体外活性检测
%A 吴祖泽
%A 崔春萍
%A 张达矜
%A 张霄翔
%A 杜劭君
%A 魏苹
%J -
%D 2007
%X 目的：建立rhHPPCn在大肠杆菌中的表达体系，纯化表达产物并检测其体外生物活性。方法：以pUC18-HPPCn为模板，构建原核表达载体pET-24a(+)-HPPCn，转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达目标蛋白，离子交换色谱法纯化目标蛋白，Western blot分析其免疫原性，MTT法和3H-TdR掺入法检测其体外活性。结果：成功构建出原核表达载体pET-24a(+)-HPPCn，并诱导使目标蛋白的表达量较高，表达产物中HPPCn 23％以可溶形式存在，两步离子交换后可得纯度为94.2％，Western blot鉴定为目的蛋白，MTT法和3H-TdR掺入法检测其具有明显的促肝癌细胞系增殖活性。结论：成功构建出原核表达载体并实现了目标蛋白高表达，两步离子交换法纯化出所需纯度的蛋白，并验证了其较强的体外促肝癌细胞系增殖活性
%K HPPCn
%K 原核表达
%K 阴离子交换层析
%K 肝癌细胞系增殖
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract1793.shtml