%0 Journal Article
%T 重组人红细胞生成素二聚体不同真核表达载体的构建及表达
%A 张春莉
%A 有红霞
%A 朱迅
%A 李景利
%A 李秋生
%A 李金凤
%A 杜柏榕
%J -
%D 2005
%X 为构建重组人红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)二聚体真核表达载体,应用PCR方法扩增EPO cDNA,PCR产物克隆入T载体后,经酶切、连接、转化等过程分别构建了3个EPO二聚体的真核表达载体pBT-1c、pBT-2s及pBT-3c,经测序序列完全正确。然后将3个真核表达载体分别转染于CCS-7细胞及CHO-dhfr-细胞中,用ELISA方法检测,它们在COS-7的瞬时表达量分别为4IU／ml、11.5IU／ml和7.2IU／ml。其中EPO二聚体真核表达载体pBTsv稳定转染CHO-dhfr-细胞后,用氨甲喋呤(MTX)逐渐加压的方法筛选到阳性克隆,表达量可达到4000IU／106cells／72h
%K 人重组红细胞生成素
%K 真核表达载体
%K 二聚体
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract3652.shtml