%0 Journal Article
%T 三种酵母启动子在毕赤酵母中的功能比较
%A 李丰功
%A 陆毅
%A 饶志明
%A 李丰功
%A 蒋慧慧
%A 陆毅
%A 饶志明
%J -
%D 2011
%X 启动子是基因表达调控的重要顺式元件,启动子功能的强弱对于目的基因的表达非常重要。为找到一个启动转录功能较好的启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,在毕赤酵母中研究不同启动子对外源蛋白表达的影响。首先采用PCR扩增的方法克隆了酿酒酵母甘油合成关键酶3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子pScgpd,借助于载体pPIC9K和pGAPZB,构建pPIC9K-gfp和pPIC9K-PG,pGAPZB-gfp和pGPDZB-gfp,将重组载体分别转入毕赤酵母GS115和毕赤酵母X33中,在不同渗透压条件下培养重组菌,通过GFP的表达情况比较启动子pScgpd与甲醇氧化酶启动子pAOX1、3-磷酸甘油醛脱氢酶启动子pGAP的功能。荧光显微镜观察结果显示,pScgpd表现为受高渗条件诱导,重组毕赤酵母P.pastoris GS115和P.pastoris X33均能产生稳定的荧光,且在一定范围内随着葡萄糖或NaCl浓度的增加,GFP表达强度也有所增加;但分别与对应宿主P.pastoris GS115、P.pastoris X33的启动子pAOX1和启动子pGAP相比,表达水平仍较弱
%K 3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子
%K <em>pAOX1</em>
%K <em>pGAP</em>
%K 毕赤酵母
%K 绿色荧光蛋白
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract3951.shtml