%0 Journal Article %T 胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因新型真核表达载体的构建及其在盐藻中的表达 %A 代靖宇 %A 张婷 %A 张晓琳 %A 柴晓杰 %A 代靖宇 %A 张婷 %A 张晓琳 %A 徐文琦 %A 柴晓杰 %J - %D 2011 %X 应用PCR技术扩增Nos基因、 CaMV35S 启动子片段和氯霉素抗性基因 Cat ,并与胰蛋白酶抑制剂 KSTI3 基因连接,构建真核表达载体pMDCKN-Cat。DNA序列分析结果表明:表达载体中的胰蛋白酶抑制剂 KSTI3 基因、启动子 CaMV35S 、终止子 Nos 和氯霉素抗性基因 Cat 与已知序列完全一致。采用LiAc/PEG介导法将质粒pMDCKN-Cat转化至盐藻细胞中,通过氯霉素抗性基因筛选和PCR鉴定获得转基因盐藻细胞。经Western blotting检测,在硝酸纤维素膜上出现清晰的条带,分子量为20.1kDa,证明胰蛋白酶抑制剂 KSTI3 基因在盐藻中得到成功表达 %K 胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因 %K 盐藻 %K LiAc/PEG介导法 %K 真核表达载体 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract2346.shtml