%0 Journal Article %T DNA聚合酶与引物/模板的相互作用对PCR效率的影响 %A 刘建平 %A 张俊威 %A 朱坚 %A 杨奇奇 %A 黄强 %J - %D 2014 %R 10.13523/j.cb.20140502 %X PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。传统的PCR引物设计软件基本上忽略了DNA聚合酶与引物/模板的亲和性对PCR效率的影响。为揭示DNA聚合酶与引物/模板的相互作用是否对PCR的效率有影响,通过构建Taq DNA 聚合酶与不同序列引物/模板DNA相互作用的三维结构模型,采用MM/GBSA方法计算复合物的结合自由能,以结合自由能为参数,为人血清白蛋白基因(Human Serum Albumin gene,HSA gene)和结核杆菌pyrF基因(Mycobacterium tuberculosis pyrF gene)设计了PCR引物。PCR实验结果表明,引物的PCR效率与结合自由能相关:引物与聚合酶的结合自由能越低,PCR实验的效率相对越高。这说明DNA聚合酶与引物/模板的相互作用对PCR效率有重要影响。因此,引物/模板DNA与聚合酶的结合自由能可以作为PCR引物设计的新参数 %K PCR %K DNA聚合酶 %K 引物设计 %K 结合自由能 %K 分子建模 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract5143.shtml