%0 Journal Article %T 流式检测PNH克隆的方法学探讨及临床筛检和意义 * %A 刘艳荣 %A 常艳 %A 王亚哲 %A 石红霞 %A 石韦华 %A 袁晓英 %A 贺玲玲 %A 郝乐 %A 黄晓军 %J - %D 2019 %R 10.13523/j.cb.20190905 %X 目的: 探讨流式细胞仪高敏感方法检测PNH克隆的必要性和血细胞减少患者PNH克隆的发生率及临床意义。方法: 采用CD59检测红细胞及FLAER联合CD24或CD14检测粒细胞和单核细胞的方法检测了20例健康志愿者和1 095例血细胞减少患者的PNH克隆比例,同时对31例患者采用传统的CD59方法检测粒细胞和单核细胞中CD59 -细胞比例。 结果: 根据健康志愿者正常背景和患者获取的细胞数,确定粒细胞、单核细胞和红细胞PNH克隆的最低检测限(LOD)分别为0.04%、0.10%和0.05%;827例患者FLAER -CD24 -粒细胞、FLAER -CD14 -单核细胞和CD59 -红细胞的中位比例分别为0.02%、0.02%和0.03%;318例(38.45%)患者粒细胞PNH克隆高于LOD,180例FLAER -CD24 -粒细胞<1.00%,粒红和粒单细胞的一致性只有43%~45%。138例FLAER -CD24 -粒细胞≥1.00%,粒红、粒单和粒单红细胞的一致率分别为91.30%、97.83%和89.86%;比较CD59 -和FLAER -CD24 -粒细胞、CD59 -和FLAER -CD14 -单核细胞比例,CD59 -细胞比例明显更低(P<0.000 1和P=0.000 9);26.85%和24.54%患者因出现FLAER -CD24 +粒细胞与FLAER -CD14 +单核细胞,导致FLAER单阴比例高于FLAER和锚连蛋白双阴比例,对PNH克隆比例低于0.10%的患者影响更大;36例PNH患者和50例MDS或AA患者PNH克隆比例分别为90.30%(44.49%~99.05%)和1.30%(0.10%~96.07%)(P<0.000 1);PNH克隆比例等于41.81%时,诊断PNH的敏感度和特异度分别为100.0%和96.0%。 结论: 在本实验条件下根据正常背景值,确定粒细胞、红细胞的LOD分别为0.04%和0.05%。粒细胞PNH克隆比例≥1.00%,与单核和红细胞诊断PNH克隆阳性结果更一致,PNH克隆比例高于41.81%时PNH疾病可能性更大 %K PNH克隆 %K 嗜水气单胞菌溶素变异体(FLAER) %K 流式细胞仪 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract6434.shtml