%0 Journal Article %T 新型R-扁桃酸脱氢酶的基因挖掘及表达鉴定 * %A 丁朋举 %A 史红玲 %A 唐存多 %A 姚伦广 %A 许建和 %A 阚云超 %A 马越 %J - %D 2018 %R 10.13523/j.cb.20180205 %X R-扁桃酸脱氢酶在苯乙酮酸的生物合成中起着关键的作用,挖掘具有高催化活性及稳定性的新型R-扁桃酸脱氢酶具有重要的意义。为了获得理想的R-扁桃酸脱氢酶,采用了基因组挖矿技术从Lactobacillus harbinensis菌株中获得了一个新型的R-扁桃酸脱氢酶LhDMDH,重组LhDMDH的比酶活高达1264.3 U/mg,约为探针的4倍,在已报道的R-扁桃酸脱氢酶中处于领先水平。同时,考察了4个重组酶主要的酶学特性,它们的最适反应温度在25~30℃,最适反应pH在9.0~9.5。动力学参数的结果表明,LhDMDH对底物的Kcat值为30.28 S -1,明显高于其它重组酶。此外,底物谱分析的结果也表明LhDMDH在外消旋扁桃酸的手性拆分及苯乙酮酸的生物合成中更具优势。在R-扁桃酸脱氢酶基因挖掘方面取得了较为理想的结果,为进一步的改造及应用奠定了坚实的基础,也为其它酶的挖掘提供了可资借鉴的经验 %K 扁桃酸脱氢酶 %K 基因组挖矿 %K 表达 %K 酶学特性 %K 生物催化 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract6168.shtml