%0 Journal Article
%T 补体C3与BPI活性区融合蛋白（CB）的构建与表达
%A 周勇
%A 王全立
%A 甘慧
%A 詹林盛
%J -
%D 2007
%X 补体C3和杀菌通透性增加蛋白（BPI）对血液中的病原体均有黏附、促吞噬甚至杀灭作用，但两者的作用机制不同，制备两者活性区融合蛋白，可能具有更好的清除血液病原的作用。通过重叠延伸PCR融合人补体C3的补体受体Ⅰ、Ⅲ两个结合区，同时调取了杀菌通透性增加蛋白（BPI）活性区段rBPI，先后将补体C3活性区与BPI蛋白功能区基因克隆入原核表达载体pET28a中，获得融合蛋白（CB）表达载体pET28-CB，在大肠杆菌中进行了高表达产量、可溶性表达等条件的摸索，CB融合蛋白主要以包涵体形式表达，Western印迹证明CB具有C3的抗原活性，将包涵体蛋白变性与复性后，利用Ni2+固相化的螯合Sepharose Fast Flow亲和层析柱进行浓缩和纯化，最后得到了纯度较高的CB原核表达蛋白。CB融合蛋白的构建和高效表达、纯化为下步探讨其在促进血液病原清除上的功能鉴定和应用奠定了基础
%K 补体C3
%K 杀菌通透性增加蛋白
%K 原核表达
%K 包涵体
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract2626.shtml