%0 Journal Article
%T 应用RNAi技术培育抗2种病毒病的转基因烟草
%A 万秀清
%A 储成才
%A 康宏
%A 李丽杰
%A 白先权
%A 郭兆奎
%A 颜培强
%J -
%D 2007
%X 分别提取烟草普通花叶病(TMV)和烟草黄瓜花叶病（CMV）的病毒RNA。经反转录和外壳蛋白阅读框PCR扩增，获得TMV和CMV外壳蛋白基因cDNA, 分别进行两种病毒已知株系cDNA序列比对获得各自的保守序列，设计干涉序列，将干涉片段扩增产物连接到pMD18-T的相邻酶切位点，制备融合序列，并将其正向和反向序列插入pUCCRNAi载体,再转化到pCAMBIA2300-35S-OCS表达载体中。利用农杆菌LBA4404侵染烟草K326,获得3份含有TMV和CMV外壳蛋白基因干涉序列的转化材料，经分子鉴定证实干涉序列已导入烟草，并采用荧光定量PCR技术对其mRNA表达差异进行分析。抗病性调查表明转化烟株对TMV和CMV抗性都显著增强
%K RNAi
%K TMV
%K CMV
%K 烟草
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract1084.shtml