%0 Journal Article
%T 拟南芥双油体蛋白融合表达KGF-2及其生物学活性研究
%A 刘敏
%A 姜潮
%A 李校堃
%A 王晓艳
%A 田海山
%A 艾君
%J -
%D 2015
%R 10.13523/j.cb.20150103
%X 目的:构建p1301-YO-K2-YO双油体KGF-2融合蛋白表达载体并转化拟南芥,与p1301-YO-K2单油体KGF-2融合蛋白表达载体对比,观察是否能够提高外源蛋白KGF-2的表达量,并对融合蛋白生物学活性进行鉴定。方法:PCR获得拟南芥油体蛋白oleosin和KGF-2核心区基因片段,融合PCR获得 KGF-2-oleosin 融合基因,与包含有一个oleosin的p1301-oleosin载体连接,构建p1301-YO-K2-YO(oleosin-KGF-2-oleosin)表达载体,利用农杆菌介导法将其转入拟南芥中进行表达,除草剂筛选获得转基因植株,通过PCR鉴定、SDS-PAGE、Western blot对KGF-2蛋白表达进行分析,提取油体蛋白涂抹法观察对C57BL/6小鼠的毛囊促生长作用。结果:双油体载体成功转入拟南芥基因组中;Western blot灰度分析可知,与单油体表达载体p1301-YO-K2相比,双油体融合表达策略可使KGF-2蛋白表达量提高2.5倍左右;动物实验结果表明油体融合蛋白具有良好的促毛囊增殖活性
%K 拟南芥
%K 角质细胞生长因子-2
%K 双油体KGF-2 融合蛋白
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract5511.shtml