%0 Journal Article %T 单克隆抗体制备的亲和填料在血浆高丰度蛋白分离中的应用研究 %A 姜颖 %A 宁云山 %A 彭丹丹 %A 方勤美 %A 李妍 %A 李明 %A 王云丹 %A 邓新宇 %J - %D 2008 %X 分离去除高丰度蛋白成为血浆蛋白质组研究的关键问题之一。我们从已建株的17株抗人血浆白蛋白单克隆抗体库中选出一株合适抗体。该抗体用Protein G Sepharose 4B吸附,然后用交联剂DMP(Dimethyl pimelinediimidate chloride)使之与Protein G 蛋白共价交联。实验结果显示600μL(结合1mg抗体)胶能分离10μL血浆中的白蛋白和球蛋白。填料进行重复使用10次后吸附能力变化无显著改变。对填料的吸附蛋白进行MALDI-TOF/TOF 鉴定主要为白蛋白和球蛋白,及其碎片,但发现吸附的蛋白有转铁蛋白,纤维蛋白原,抗胰蛋白酶,前脂蛋白,Vitamin D 结合蛋白,Keratin 10和 CD5 antigen like蛋白。实验结果表明该方法能在固定目的抗体同时最大量地保持抗体活性,该方法有望在蛋白质组学研究的高丰度蛋白分离中得到广泛应用 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract2275.shtml