%0 Journal Article
%T 融合蛋白NusA-hRI的高效异源表达、纯化及活性分析
%A 付大伟
%A 孙莹莹
%A 徐伟
%J -
%D 2019
%R 10.13523/j.cb.20190304
%X 人核糖核酸酶抑制因子 (human ribonuclease inhibitor, hRI) 是一种能够调节核糖核酸酶活性的酸性包浆蛋白。通过构建含SUMO、IF2、GST、NusA 、MsyB、Trx和 MBP融合标签的重组表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌进行自诱导(auto-induction,AI)表达,从而使 hRI 的表达量得以提升。利用MagNi磁珠纯化及电泳分析hRI的表达状况,通过RNase/Sepharose亲和层析获得纯度较高的蛋白。纯化后获得的融合蛋白浓度为2 960.513mg/L,与其它公司的hRI活性进行比较,检测其酶活性约为50U/μl,并使其成功用于RNA的保护,为NusA-hRI的应用提供理论依据
%K 人核糖核酸酶抑制因子
%K 融合标签
%K 诱导表达
%K 磁珠纯化
%K 亲和层析
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract6346.shtml