%0 Journal Article %T 大鼠NKx6.1启动子克隆及特异性表达分析 %A 姚远 %A 张欣 %A 张瑞 %A 汪蓓蕾 %A 王大玮 %A 郭刚 %A 陈皓 %J - %D 2016 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.017 %X 摘要 旨在构建大鼠NKx6.1启动子的报告载体,验证转录因子T3R对NKx6.1启动子的调控活性。用PCR扩增大鼠脑组织NKx6.1的 5'上游启动子片段2.4 kb,应用生物信息学方法预测该片段上潜在的转录因子T3R结合位点,根据不同的结合位点作系列截短,获得3段长度不等的启动子缺失片段,分别克隆到荧光素酶报告基因表达质粒(pGL3-Basic)上,构建相应的报告载体。将报告载体和T3R共转染大鼠星形胶质细胞(rat astrocytes,RA),并检测报告基因荧光素酶的活性。结果显示,成功构建大鼠NKx6.1启动子报告载体,双荧光素酶报告基因活性检测表明T3R对NKx6.1启动子有明显调控作用,其中-1 887 bp-1 507 bp活性最高,即存在关键顺式调控元件。克隆并筛选出启动子核心区域,揭示了甲状腺激素对大鼠NKx6.1的表达调控机制 %K 同源盒基因NKx6.1 %K 甲状腺激素 %K 双荧光素酶报告检测 %K 启动子活性 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract11221.shtml