%0 Journal Article %T 氧化葡萄糖酸杆菌中5-葡萄糖酸脱氢酶基因的克隆、表达及酶学性质分析 %A 严明 %A 李翎 %A 李艳 %A 许琳 %A 魏淼 %J - %D 2014 %X 摘要 根据NCBI上的报道的基因序列设计引物,以氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacteroxydans)H24的基因组为模板,获得5-葡萄糖酸脱氢酶(Ga5DH)基因,将其与表达载体pET-28a连接,构建重组质粒pET-28a-Ga5DH,并转化大肠杆菌Rosetta进行表达。SDS-PAGE检测结果显示,表达蛋白的分子大小为26.5kD,纯化后酶活达7.83U/mg。酶学性质分析表明,该酶的最适反应温度为40℃,最适pH为11。在pH9-11的缓冲中保温8h,酶活力仍有80%以上的残余。该酶对多种有机溶剂具有良好的耐受性 %K 5-葡萄糖酸脱氢酶 %K 氧化葡萄糖酸杆菌 %K 表达 %K 酶学性质 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract10391.shtml