%0 Journal Article %T 水稻白叶枯病菌c-di-GMP受体Clpxoo关键结合功能位点的确定 %A 何晨阳 %A 李建宇 %A 李波 %A 杨凤环 %A 田芳 %A 陈华民 %J - %D 2016 %X 摘要 旨在确定水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv. oryzae,Xoo)c-di-GMP信号受体Clpxoo的关键功能位点。通过对Clpxoo蛋白氨基酸位点基因突变,表达载体构建、蛋白诱导表达及其Ni-NTA Resin亲和层析,进行了Clpxoo 及其点突变蛋白的原核表达和产物纯化;通过等温滴定量热法(ITC),检测了Clpxoo 及其点突变蛋白与c-di-GMP的结合作用。利用基因定点突变和桥接PCR方法,在优化的诱导表达和纯化条件下,成功地获得了Clpxoo点突变蛋白和与c-di-GMP不发生结合的Clpxoo点突变体。结果表明,Clpxoo蛋白第70位天冬氨酸和第99位谷氨酸是与c-di-GMP结合的关键功能位点 %K 水稻白叶枯病菌 %K c-di-GMP %K 信号受体蛋白 %K 点突变体 %K 结合作用 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract11368.shtml