%0 Journal Article
%T NPR1多肽抗体的制备和应用
%A 于丹丹
%A 刘家驹
%A 宋宝安
%A 李向阳
%A 杨松
%A 毕亮
%A 王贞超
%A 胡德禹
%A 陈卓
%J -
%D 2012
%X 摘要 根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为65 kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的NPR1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度
%K 非表达型病程相关蛋白
%K 序列分析
%K 多肽
%K 合成
%K 多克隆抗体
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract6316.shtml