%0 Journal Article %T 葡萄病毒B的RT-PCR检测技术研究 %A 代永欣 %A 杨相昆 %A 牛建新 %A 王林 %A 田海燕 %J - %D 2010 %X 摘要 旨在建立适合葡萄的葡萄病毒B的RT-PCR检测技术。从感染葡萄病毒B的葡萄皮层中提取总RNA,以其为模板合成cDNA第一链,并利用两对引物分别进行PCR扩增;回收PCR特异扩增产物,与pUCm-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。结果显示,两对引物均能获得与预期片段大小一致长约460 bp和470 bp的扩增产物扩增片段序列与已报道GVB序列(序列号:X75448)的核苷酸同源性均为81%,经反复多次试验证实,利用总RNA为模板合成cDNA并进行PCR扩增检测GVB是准确、可靠的 %K 葡萄病毒B %K 检测 %K 重组质粒 %K 序列 %K 同源性 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract5522.shtml