%0 Journal Article
%T 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3真核表达载体的构建及在细胞中的表达
%A 吴萌
%A 崔硕
%A 张昭军
%A 方向东
%A 李泽夏
%A 程华
%J -
%D 2016
%R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.05.019
%X 摘要 构建载体表达人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican-3，GPC3）蛋白，用以获得抗GPC3单克隆抗体。用PCR技术扩增GPC3基因，利用酶切位点将该序列插入p3XFLAG-CMV-14载体，构建pCMV-gpc3表达载体。通过脂质体将该载体转染至HEK293细胞中，利用Western blot技术检测最终结果。收集稳定表达的细胞，破碎，通过亲和层析柱，获得纯度较高的GPC3蛋白。成功构建pCMV-gpc3真核表达载体，转染至HEK293细胞后，经G418筛选获得稳定表达的单克隆细胞系；Western blot分析结果表明目的蛋白高效表达
%K 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3
%K 真核表达
%K 脂质体转染
%K 亲和纯化
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract11111.shtml