%0 Journal Article %T 构建骨骼肌特异表达人FS基因载体及其稳定转染绵羊胎儿成纤维细胞 %A 仓明 %A 刘东军 %A 岳群华 %A 朱兵 %A 梁浩 %A 王玮 %A 袁建龙 %A 郭旭东 %A 金永 %J - %D 2011 %X 摘要 旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素(follistatin,FS)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础。首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与猪骨骼肌特异表达启动子α-actin以及红色荧光蛋白表达元件连接,构建成FS基因骨骼肌特异表达载体pCFCDS。脂质体介导外源表达载体转染绵羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选后得到稳定转染的绵羊转基因细胞克隆。PCR鉴定外源基因在细胞基因组中的整合,分析转基因细胞系的核型和生长状况。结果显示,成功构建得到绵羊骨骼肌特异表达人FS基因的真核表达载体,并得到其稳定转染的转基因绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础 %K 绵羊 %K 卵泡抑制素 %K 骨骼肌特异表达载体 %K 转基因细胞系 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract6244.shtml