%0 Journal Article
%T 人组蛋白α-氨基乙酰基转移酶Nat11表达纯化、晶体生长及底物结合研究
%A 李海涛
%A 黄嘉欣
%J -
%D 2014
%X 摘要 α-氨基乙酰基转移酶11（Nat11）催化组蛋白H4和H2A氨基端乙酰化修饰,发挥着重要的表观遗传调控功能。将人Nat11基因构建到原核表达载体pSUMO中,转化入大肠杆菌BL21（DE3）进行重组表达。通过镍柱亲和层析等一系列体外纯化步骤,获得高纯度Nat11。利用等温滴定量热法（ITC）,测得Nat11与底物多肽微摩尔量级结合常数。利用质谱技术,发现纯化后的Nat11结合有大肠杆菌内源产生的乙酰辅酶A或辅酶A,在ITC滴定过程中可以产生对多肽底物的乙酰化修饰,表明纯化获得的Nat11在溶液中具有酶活力。随后,对Nat11进行晶体生长研究,通过初筛优化获得蛋白截短体及底物-酶融合蛋白单晶
%K α-氨基乙酰基转移酶11
%K 重组蛋白表达
%K 蛋白聚集
%K 酶-底物结合
%K 晶体生长
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract10463.shtml