%0 Journal Article
%T 白喉毒素突变体CRM197在大肠杆菌中表达纯化及性质研究
%A 侯登勇
%A 孙丽霞
%A 王庆民
%A 王晶翼
%A 董相陈
%A 赵雪娜
%J -
%D 2010
%X 摘要 CRM197是一种白喉毒素突变体,作为载体蛋白广泛用于疫苗开发。将合成的CRM197基因片段克隆到表达载体pET25b中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,CRM197获得高效表达,达到菌体总蛋白的20%。目的蛋白主要以包涵体形式存在,变性、复性后经DEAE阴离子交换、S-100分子筛纯化获得纯度高于95%的CRM197样品,用该蛋白样品免疫新西兰大白兔,免疫兔血清中检测到特异性抗体应答。急性毒性试验中,每只豚鼠皮下注射200μgCRM197纯化样品,未出现明显毒性反应症状,与之相比较,注射后48h内,20ng白喉毒素阳性对照组动物全部死亡。结果表明,利用本试验的表达策略,CRM197得到高效表达,并且具有良好的免疫原性和安全性,为其进一步生产及应用奠定基础
%K CRM197
%K 白喉毒素
%K 包涵体
%K 免疫原性
%K 急性毒性
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract5800.shtml