%0 Journal Article %T 响应面法优化脯氨酸羟化酶转化反应工艺条件 %A 何广正 %A 张琳琳 %A 徐书景 %A 郑豆豆 %A 鞠建松 %A 罗素亚 %J - %D 2020 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985-0834 %X 摘要 通过优化脯氨酸羟化酶表达条件和转化反应条件,提高其转化反应效率。采用单因素法筛选脯氨酸羟化酶的最佳诱导温度、诱导剂浓度和转化反应条件,并采用响应面法预测影响转化反应各因素的最佳条件。结果显示,经过筛选和验证,蛋白表达最适诱导温度为28℃,IPTG浓度为0.2 mmol/L;转化反应最佳条件为:120 mmol/L 2-(N-吗啡啉)乙磺酸(pH 6.6)、1.5% Nonidet P-40、200 mmol/L L-脯氨酸、200 mmol/L α-酮戊二酸,6 mmol/L L-抗坏血酸、6.0 mmol/L 硫酸亚铁,最适反应温度为27℃,振荡速率为152 r/min。在最佳条件下,转化反应进行48 h后产物反式-4-羟基-L-脯氨酸的转化率可达100%,为合成反式-4-羟基-L-脯氨酸奠定了坚实的实验基础 %K 反式-4-羟基-L-脯氨酸 %K 脯氨酸羟化酶 %K 响应面法 %K 转化率 %K 工艺条件 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract12730.shtml