%0 Journal Article
%T 牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估
%A 康峰
%A 张荣芳
%A 扈廷茂
%A 李光鹏
%A 杨春荣
%A 段彪
%A 王子东
%A 胡晓明
%A 苏建国
%A 高广琦
%J -
%D 2012
%X 摘要 采用RT-PCR扩增亚麻种子(Linum usitatissimumLinn)FAD3B基因,构建不同启动子的两种重组真核表达载体pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B和pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,通过qRT-PCR检测转基因细胞中FAD3B基因的表达水平。以不同过表达水平的转基因细胞为试验对象,评价9种候选内参基因ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2和HMBS的稳定性。根据GeNorm、NormFinder和BestKeeper 3种统计学算法得到的稳定性值对基因进行排序。结果显示,内参基因稳定性的综合排序为PPP1R11>EEF1A2>18S rRNA>RPS15A>GAPDH>HMBS>UXT>ACTB>SF3A1,其中PPP1R11和EEF1A2是最稳定的内参基因。稳定内参的选择可以更加准确地校正基因的表达水平,从而为阐述基因的功能奠定了坚实的基础
%K 实时荧光定量RT-PCR
%K 转基因细胞
%K 内参基因
%K GeNorm
%K NormFinder
%K Bestkeeper
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract6640.shtml