%0 Journal Article %T 铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达 %A 朱修良 %A 李清海 %A 刘伟 %J - %D 2017 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.02.026 %X 摘要 旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达。PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至pLenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞。荧光显微镜观察细胞内GFP荧光情况,Western blot检测Fth1的表达情况,WST-1试剂检测Fth1慢病毒感染组(RMSC-Fth1)和空载体组(RMSC-GFP)的细胞增殖活性。DNA测序结果表明,pLenti-GFP-C-Fth1慢病毒载体构建成功。包装慢病毒感染RMSC细胞后,荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明感染成功。Western blot结果显示,实验组细胞裂解液中可检测到特异的Fth1表达条带。细胞增殖实验显示,与空载体组相比,过表达Fth1并不影响RMSC细胞生长。成功构建并包装携带大鼠Fth1基因的慢病毒,其能够成功感染RMSC细胞并表达Fth1蛋白,且对细胞增殖无明显影响 %K Fth1 %K 磁共振报告基因 %K 慢病毒载体 %K 大鼠骨髓间充质干细胞 %U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract11426.shtml