%0 Journal Article
%T 猪细小病毒LDR-PCR检测方法的建立和应用
%A 丁先锋
%A 姜永厚
%A 徐辉
%A 汪平
%A 程菊会
%A 董沁芳
%A 郭江峰
%A 郭瑶
%J -
%D 2012
%X 摘要 为准确特异灵敏地检测猪细小病毒(PPV),建立一种新的LDR-PCR方法。首先在病毒的保守区内设计一对LDR探针,LDR探针两端各连有一段引物对应序列,以连接产物为模板进行PCR,琼脂糖凝胶电泳检测结果。以标准质粒为模板,通过对LDR反应的退火温度、连接酶浓度及探针浓度等反应条件进行优化,确定了LDR最佳的反应体系,并建立了LDR-PCR方法。结果表明,可以特异地检测PPV,与猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒(PCV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)无交叉反应;最低检测限为102个拷贝。利用建立的方法对41例临床样本进行检测,14份样品PPV阳性,与普通PCR检测结果符合率为97.6%
%K LDR-PCR
%K 猪细小病毒
%K 条件优化
%K 检测
%U http://journal03.magtech.org.cn/Jweb_swjstb/CN/abstract/abstract6341.shtml