%0 Journal Article %T 内生多粘芽孢杆菌EJS-3纤溶酶基因在毕赤氏酵母中的表达 %A 别小妹 %A 吕凤霞 %A 张充 %A 赵海珍 %A 钱辉 %A 陆兆新 %J - %D 2014 %R 10.13523/j.cb.20141207 %X 以自构建的重组质粒pET-DsbA/PPFE-I为模板,扩增内生多粘芽孢杆菌纤溶酶基因PPFE-I,构建Pichia pastoris表达载体pPICZαA/PPFE-I,通过电击转化,pPICZαA/PPFE-I 被整合到Pichia pastoris SMD1168基因组中,抗性筛选得到的阳性转化子,用终浓度为1%甲醇诱导72 h,酶活达到286 IU/ml,是野生菌的2.6倍,表达产物用SDS-PAGE进行分析,在相对分子质量63 kDa处出现明显的蛋白条带,降解人血纤维蛋白试验中rPPFE-I最先降解人血纤维蛋白原的α链,其次是β链,而对γ链降解最缓慢。实现了多粘类芽孢杆菌纤溶酶基因在毕赤酵母中的表达,为植物内生菌来源溶栓药物的开发提供了新的途径 %K 纤溶酶 %K 毕赤氏酵母 %K 异源表达 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract5498.shtml