%0 Journal Article
%T 大豆油体与EGF融合基因的克隆及其在红花种子中的表达
%A 冯治国
%A 刘敏
%A 姜潮
%A 庞实锋
%A 李文荣
%A 李校堃
%A 楚生辉
%A 郑克勤
%J -
%D 2014
%R 10.13523/j.cb.20140412
%X 目的：旨在建立一种在红花油体中表达EGF的转基因植物的方法。方法：通过PCR技术把大豆油体基因（DDoil）与EGF构建成融合基因，克隆至植物表达载体pCAMBIA1390R中，构建成植物表达载体p1390Do-EGF，然后转化进农杆菌 LBA4404 中用于侵染红花外植体，通过甘露糖筛选培养基培养可获得红花转化苗。通过PCR、实时荧光相对定量RT-PCR、SDS-PAGE和Western blot分析目的基因的表达情况，通过MTT法检测EGF的促细胞增殖活性。结果：PCR结果显示，红花叶片中能检测到EGF基因；实时荧光相对定量RT-PCR结果显示，在红花种子中EGF能成功实现转录；SDS-PAGE和Western blot检测证明，在转基因红花种子中能有效表达出EGF，并具有其原有的免疫原性，MTT法实验结果表明EGF具有促进balb/c 3T3细胞增殖的生物活性。结论：大豆油体和EGF融合基因已经成功转化进红花细胞的基因组中，并实现了EGF外源蛋白在红花种子油体中的表达，为EGF蛋白的产业化生产探讨了一种新的生产途径
%K 油体
%K 表皮生长因子
%K 转基因红花
%K 融合基因
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract5707.shtml