%0 Journal Article %T 利用Red重组系统敲除大肠杆菌 O157:H7的waaL 基因 %A 信国 %A 陈敏 %A 马中瑞 %A 信国 %A 杨公进 %A 马中瑞 %J - %D 2011 %X 目的:利用λ噬菌体Red重组系统敲除大肠杆菌O157:H7的waaL基因。方法:以pKD4为模板扩增出与waaL基因上下游同源的、含有卡那霉素抗性基因的PCR产物。然后电击转化到大肠杆菌 O157:H7 中,利用Red重组系统,通过卡那霉素抗性基因两侧的waaL基因序列在体内与waaL基因发生同源重组,置换了 O157:H7 基因组中的waaL基因。并进一步利用卡那霉素抗性基因两侧的FRT位点,通过FLP位点专一性重组将卡那霉素抗性基因敲除。结果:成功构建了敲除waaL基因且不带卡那霉素抗性基因的菌株 %K H7 %K &lambda %K -Red重组系统 %K waaL基因 %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract4990.shtml