%0 Journal Article
%T 乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)在毕赤酵母中的表达纯化及活性鉴定
%A 刘晓波
%A 刘芳铭
%A 张博
%A 张晓康
%A 李秦剑
%A 王媛媛
%A 田焕娜
%A 葛建峰
%A 马思思
%A 刘晓波
%A 刘芳铭
%A 吴琛
%A 张博
%A 张晓康
%A 李秦剑
%A 王媛媛
%A 田焕娜
%A 葛建峰
%A 马思思
%J -
%D 2011
%X 将GALNT14全长编码区克隆到分泌型酵母表达载体pPIC9K中,构建重组载体pPIC9K-T14,经电转至毕赤酵母GS115中表达,使用G418筛选高表达重组菌,并对诱导条件进行优化,表达产物使用SDS-PAGE分析、Western blot鉴定、Sephadex G-100纯化、最后经HPLC检测活性。结果显示,在提供更好的供氧量条件下,用0.75％甲醇诱导可提高目的蛋白的表达量而降低杂蛋白的表达。培养上清液经SDS-PAGE检测显示目的蛋白分子量约64 kDa;Western blot结果显示在相应分子量处有一条特异性条带;利用Sephadex G-100成功分离纯化了目的蛋白;活性测定结果显示所获得的目的蛋白具有催化活性,为深入研究GALNT14的结构与功能奠定了基础
%K GALNT14
%K 毕赤酵母
%K 分泌表达
%K 纯化
%K 活性测定
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract5224.shtml