%0 Journal Article
%T 地高辛标记Ucp2基因RNA探针的制备和应用 *
%A 刘志贞
%A 加三三
%A 孙雨晴
%A 张凯丽
%A 李美宁
%A 牛勃
%A 赵虹
%A 郝宇卉
%J -
%D 2018
%R 10.13523/j.cb.20180908
%X 目的: 制备用于检测小鼠胚胎早期Ucp2基因表达的地高辛标记的特异性RNA探针。方法: 提取小鼠胚胎脑组织总RNA,设计引物,通过RT -PCR方法获取Ucp2基因片段,将其克隆到pGEM -T载体。分别利用Sp6、T7和Ucp2特异性引物,PCR扩增获得转录模板,通过Sp6及T7 RNA聚合酶,获得地高辛标记的正义、反义Ucp2 RNA原位杂交探针。检测标记探针的效价后,通过全胚胎原位杂交分析制备探针的特异性和杂交效果。结果:成功获得Ucp2基因正义、反义探针,反义探针能高效灵敏检测到Ucp2基因在小鼠胚胎Ed9.5、Ed10.5神经系统呈现高表达,而正义探针未能检测到表达信号。 结论:成功制备了特异高效的地高辛标记Ucp2 RNA 原位杂交探针,为进一步研究Ucp2基因在小鼠胚胎组织中的表达,尤其在神经组织的定位奠定基础
%K <i>Ucp2</i>RNA探针
%K 全胚胎原位杂交
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract6271.shtml