%0 Journal Article
%T 枯草芽孢杆菌壳聚糖酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖及其组分分析 *
%A 任立世
%A 冯翠
%A 杜昱光
%A 焦思明
%A 程功
%J -
%D 2018
%R 10.13523/j.cb.20180903
%X 对来源于枯草芽孢杆菌菌株168(Bacillus subtilis 168)的壳聚糖酶编码基因进行了序列优化及全合成,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中实现了分泌表达,表达产物的蛋白质浓度达到0.30mg/ml。表达的壳聚糖酶最适pH为5.6,最适温度为55℃,比酶活达84.54U/ml。该酶在50℃及以下较稳定。利用该酶水解低脱乙酰度壳聚糖并使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-QTOF MS)对产物的组分进行了分离及鉴定。根据一级质谱信息,推测酶解产物中包含至少37种聚合度2~18,不同脱乙酰度的壳寡糖组分。综上,利用毕赤酵母分泌表达了来源于枯草芽孢杆菌菌株168的壳聚糖酶基因,利用表达产物水解制备了低脱乙酰度壳寡糖并对其组分进行了分析,可为后续壳寡糖结构与功能关系的研究提供参考
%K 枯草芽孢杆菌
%K 壳聚糖酶
%K 毕赤酵母
%K 壳寡糖
%K UPLC-QTOF MS
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract6266.shtml