%0 Journal Article %T 犬瘟热病毒N基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达及应用 %A 张海玲 %A 张蕾 %A 徐磊 %A 柴秀丽 %A 白雪 %A 胡博 %A 赵建军 %A 赵权 %A 邵西群 %A 闫喜军 %A 高晗 %A 冯佩平 %A 张海玲 %A 张蕾 %A 徐磊 %A 柴秀丽 %A 白雪 %A 胡博 %A 赵建军 %A 赵权 %A 邵西群 %A 闫喜军 %A 高晗 %J - %D 2012 %X 目的:为检测犬瘟热抗体提供诊断抗原,应用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达犬瘟热病毒(canine distemper virus, CDV)N蛋白。方法:采用RT-PCR克隆CDV-N基因,构建重组杆粒BacmidCDV-N,并将其转染Sf9昆虫细胞。通过Western blot和间接免疫荧光检测N蛋白的表达。以表达的CDV N蛋白为包被抗原,建立了检测犬瘟热抗体的间接ELISA方法。结果:成功表达了CDV N蛋白。间接ELISA(iELISA)方法中,犬血清最佳稀释度1∶80,N蛋白稀释度1∶40(6.3μg/100μl)。应用该方法共检测了36 份犬血清,与中和试验检测方法相比较,其特异性为81.8%,灵敏度为96.0%,符合率为91.7%。结论:表达的CDV-N蛋白具有良好反应原性,建立了快速检测CDV阳性血清的iELISA方法 %K CDV-N蛋白 %K 杆状病毒表达系统 %K iELISA %U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract5322.shtml