%0 Journal Article
%T 结核杆菌抗原HSP65基因在大肠杆菌中的表达及纯化
%A 孙树汉
%A 王庆敏
%A 章建程
%A 肖存杰
%A 胡振林
%J -
%D 2004
%X 目的 :为研制预防结核病疫苗 ,选取结核杆菌HSP65蛋白为免疫抗原 ,将结核分枝杆菌HSP65抗原基因在大肠杆菌中表达、纯化。方法 :将HSP65的全长cDNA插入到原核表达载体pGEX5T中 ,构建成pGEX5T HSP65重组质粒。将质粒转化到E .coli.K80 2细菌 ,用IPTG诱导HSP65表达 ,然后用亲和层析的方法进行纯化 ,最后用Western blot方法确认表达蛋白的特异性。结果 :获得了pGEX5T HSP65重组子 ,HSP65蛋白在k80 2菌中获得了表达 ,表达的蛋白条带大小约 86kDa ,与预期的结果相符。表达产物经亲和层析后获得了较单一的蛋白条带 ;表达及纯化的蛋白在纯化前后均可被结核病患者血清特异地识别。为进一步研究其在结核病诊断和防治中的应用打下了基础
%K 结核分支杆菌
%K HSP65抗原
%K 表达纯化
%U http://manu60.magtech.com.cn/biotech/CN/abstract/abstract4250.shtml