%0 Journal Article
%T 不同亚细胞定位的alpha-突触核蛋白对SK-N-SH细胞的毒性影响
%A 张建亮
%A 杨慧
%A 赵云
%A 郑焱
%A 韩玉坤
%J 中国生物化学与分子生物学报
%D 2019
%R 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.02.07
%X 在帕金森病中，alpha-突触核蛋白（α-synuclein）累积与聚集所产生的细胞毒性是发病的重要原因。本文目的是探求不同亚细胞定位的α-突触核蛋白对于细胞的毒性影响。分别在α-突触核蛋白前插入核输出序列（nuclear export sequence，NES）或核定位序列（nuclear localization sequence，NLS）,使其特定地表达在细胞质或细胞核中。构建成功的质粒分别在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中表达，通过免疫荧光与Western印迹法检测蛋白质的表达情况。结果显示，NES-α-synuclein特异性地在细胞质中表达，NLS-α-synuclein特异性地在细胞核中表达。乳酸脱氢酶法检测结果表明，相较于WT-α-synuclein组，NES-α-synuclein组的乳酸脱氢酶的释放量减少26.54%，NLS-α-synuclein组的乳酸脱氢酶释放量增加12.85%。CCK8法检测细胞活性结果表明，相较于WT-α-synuclein组，NES-α-synuclein组的细胞活力提高35.51%，NLS-α-synuclein组的细胞活力减少7.93%。上述结果提示，胞质内表达α-synuclein对于细胞的毒性更小，而细胞核内表达的α-synuclein对细胞有更强的毒性作用。这些发现为研究帕金森病的分子机制提供了新的研究思路
%K alpha-突触核蛋白
%K 核定位序列
%K 核输出序列
%K 细胞毒性
%U http://cjbmb.bjmu.edu.cn/CN/abstract/abstract24515.shtml