%0 Journal Article %T 微型人胰岛素基因载体的构建及其在花生中的表达 %A 仵陶 %A 安胜军 %A 邵铁梅 %A 朱正歌 %A 焦展 %A 刘培 %A 李雪 %J 江苏农业科学 %D 2019 %X 制备和培养含微型人胰岛素基因的转基因花生植株,从而利用转基因花生表达微型人胰岛素。首先按照植物偏爱密码子设计合成了修饰C肽的微型人胰岛素基因(mini insulin,MI),其中胰岛素B链通过丙-丙-赖三肽和A链相连接,在表达载体pBI121上构建了由花椰菜花叶病毒CAMV35S启动子驱动表达微型人胰岛素的重组质粒RIG。质粒RIG经农杆菌介导法转化至花生胚和去胚子叶中,抗生素筛选得到转基因花生苗,之后利用PCR和Western-blot对转基因花生幼叶进行分子生物学鉴定。结果显示,试验优化了农杆菌介导的花生转基因技术,并且得到了转基因花生苗;分子生物学技术鉴定结果显示,微型人胰岛素基因成功转入花生叶片基因组中,且在花生叶片中表达,其中以花生胚为外植体长出的再生苗的阳性检测率为2.27%。目前正在探索微型人胰岛素基因在花生油体中高效表达的方法,为转基因花生规模化生产微型人胰岛素提供理论基础 %K 分子医药农业 %K 转基因花生 %K 微型人胰岛素 %K 载体构建 %K 基因表达 %U http://www.jsnykx.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201904009