%0 Journal Article %T 家兔β干扰素启动子质粒的构建及其启动子活性鉴定 %A 陈萌萌 %A 范志宇 %A 胡波 %A 宋艳华 %A 魏后军 %A 仇汝龙 %A 朱伟峰 %A 徐为中 %A 王芳 %J 江苏农业科学 %D 2019 %X 通过家兔体内感染兔出血症病毒(RHDV)后发现体内干扰素-β(Interferon-β,IFN-β)基因表达水平明显降低。为体外研究RHDV感染宿主后IFN-β启动子的调控机制,首先以家兔肝细胞总cDNA为模板,利用PCR扩增IFN-β基因启动子区的序列,经测序确定全长为550 bp;预测软件分析,与人源IFN-β基因启动子的转录上调区域(positive regulation domain,PRD)高度同源;随后将启动子全长和一系列转录元件克隆至pGL6-Basic荧光素酶表达载体中,成功构建重组体报告基因质粒后,瞬转RK-13细胞,利用试剂盒检测荧光素酶的相对活性。结果显示,克隆的IFN-β基因启动子区和AP-1、IRF3、NF-κB和IRF7等转录元件具有显著的活性,为研究兔出血症病毒对宿主 IFN-β 基因的转录调控机制提供了有效的工具 %K 家兔 %K 兔出血症病毒 %K IFN-β基因 %K 启动子 %K 荧光素酶 %K 转录调控 %U http://www.jsnykx.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201923018