%0 Journal Article %T 含扩增内对照的霍乱毒素基因ctx和不耐热肠毒素基因elt三重real-time PCR检测体系的建立 %A 张京云 %A 李杰 %A 阚飙 %J 中华流行病学杂志 %D 2014 %X 目的 建立一个含扩增内对照(IAC)的三重TaqMan real-time PCR体系,以检测霍乱毒素基因ctxA 和肠产毒性大肠埃希菌的不耐热肠毒素基因elt。方法 针对ctxA、elt 和IAC设计引物和探针,进行灵敏性和特异性分析,评价三重反应之间的互相影响。结果 该检测体系灵敏度为ctxA 每个反应94 拷贝,elt 每个反应79 拷贝,扩增效率分别为94.7%与98.1%。ctxA 与elt 拷贝数比例为1 ∶ 1~1 ∶ 10 时,二者均能良好扩增;elt 或ctxA 的量是IAC的100 倍以上时,IAC扩增受到抑制。结论 该检测体系具有良好的灵敏性和特异性,可以用于腹泻粪便中感染病原菌的检测,其中内对照检测可以提示粪便样本中是否存在PCR抑制因子 %K 霍乱毒素 %K 不耐热肠毒素 %K 实时荧光定量聚合酶链式反应 %U http://chinaepi.icdc.cn/zhlxbx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140625&flag=1