%0 Journal Article %T 甲型副伤寒杆菌侵袭蛋白(spaO)基因原核表达及免疫性和保护作用研究 %A 严杰 %A 周晓辉 %A 李晶 %A 林晓骥 %A 毛亚飞 %A 阮萍 %J 中华流行病学杂志 %D 2006 %X 目的研究甲型副伤寒杆菌spaO基因重组表达产物rSpaO免疫性和保护作用,并了解甲型副伤寒杆菌临床菌株spaO基因携带和表达情况。方法扩增并克隆甲型副伤寒杆菌临床株 JH01 spaO基因,构建原核表达系统;采用SDS-PAGE分析rSpaO表达情况,Ni-NTA亲和层析法收集 rSpaO,采用Western blot鉴定其免疫反应性;采用PCR和ELISA检测98株甲型副伤寒杆菌临床菌株 spaO基因携带和表达频率;观察rSpaO对甲型副伤寒杆菌50001株感染小鼠的免疫保护作用。结果与报道的相关序列比较,克隆的spaO基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.45%-99.89%和 99.01%-100%;rSpaO表达量为细菌总蛋白的75%左右;甲型副伤寒杆菌全菌抗血清能识别rSpaO, rSpaO免疫家兔可产生抗体;94.9%(93/98)甲型副伤寒杆菌临床菌株含有spaO基因,91.4%(85/93) spaO+菌株表达SpaO。rSpaO灌喂或皮下注射免疫小鼠(500μg)受甲型副伤寒杆菌50001株攻击后的存活率分别为58.3%和50.0%;若加入5μg rLTB,存活率分别上升88.3%和75.0%。结论甲型副伤寒杆菌临床菌株有较高的spaO基因携带率和表达率;rSpaO有良好的免疫原性和一定的免疫保护作用,可作为甲型副伤寒杆菌基因工程疫苗的候选抗原 %K 甲型副伤寒杆菌 %K spaO基因 %K 原核表达 %K 免疫原性/免疫保护 %U http://chinaepi.icdc.cn/zhlxbx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20060416&flag=1