%0 Journal Article %T CRISPR1上游侧翼序列用于大肠埃希菌和志贺菌鉴定的效果评价 %A 刘慧莹 %A 崔聪聪 %A 徐亚珂 %A 杨海燕 %A 梁文娟 %A 段广才 %A 郗园林 %A 陈帅印 %J 中华流行病学杂志 %D 2018 %R 10.3760/cma.j.issn.0254-6450.2018.12.013 %X 目的 探讨基于成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)1上游侧翼序列对大肠埃希菌和志贺菌鉴定和评价效果。方法 通过BLAST重复序列识别并获得全基因组测序大肠埃希菌和志贺菌的CRISPRs和CRISPR相关基因(CRISPR-associated,cas),并分析其种系;选取CRISPRs上、下游各500 bp侧翼序列,使用Clustal X进行序列比对;采用PCR方法扩增CRISPR1上游侧翼序列,以确定其对大肠埃希菌和志贺菌鉴定和评价效果。结果 73.4%(149/203)的大肠埃希菌存在I-E型CRISPR/Cas系统,包含了A、B1、D种系;8.4%(17/203)的大肠埃希菌存在I-F型CRISPR/Cas、17.2%(35/203)的大肠埃希菌不存在CRISPR/Cas,这2种大肠埃希菌均属于B2种系;9株志贺菌均存在I-E型CRISPR/Cas。在大肠埃希菌(B2种系外)、志贺菌CRISPR1上游和大肠埃希菌(B2种系)各存在61 bp侧翼序列,序列一致性为99%,且有种属特异性,PCR扩增此区域鉴定大肠埃希菌和志贺菌的灵敏度和特异度均>91%。结论 基于CRISPR1上游序列可用来鉴定大肠埃希菌和志贺菌,且具有很好的效果 %K 大肠埃希菌 %K 志贺菌 %K 成簇规律间隔的短回文重复序列 %K 侧翼序列 %K 鉴定 %U http://chinaepi.icdc.cn/zhlxbx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20181213&flag=1