%0 Journal Article %T 三氯乙烯对人正常肝细胞组蛋白质甲基化修饰影响的研究 %A 任晓虎 %A 刘建军 %A 卢维雪 %A 邓荣霞 %A 邹晓青 %A 郑剑 %A 钟佳成 %A 阮嘉雯 %J 中国预防医学杂志 %D 2017 %X 目的 筛选三氯乙烯(TCE)诱导的人正常肝细胞(L-02细胞)组蛋白异常甲基化修饰,并探讨其在三氯乙烯致肝细胞毒性中的可能作用。 方法 以0、8.0 mmol/L的TCE处理L-02细胞24 h,采用酸法提取组蛋白,通过液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)鉴定和定量分析组蛋白差异甲基化修饰水平,以Western blot验证组蛋白H3K79二甲基化(H3K79 me2)及H3K79三甲基化(H3K79 me3)修饰水平,检测相对表达量。使用单细胞凝胶电泳检测细胞的DNA损伤水平。采用Western blot检测p53与H2AX的磷酸化修饰(?H2AX)的相对表达量。 结果 TCE处理L-02细胞24 h后,质谱鉴定出28个肽段的36个表达有差异的组蛋白甲基化位点;L-02细胞经0、8.0 mmol/L TCE处理后,组蛋白H3K79 me3的相对表达量分别为1.00±0.06、0.70±0.09 ( t= 15.01, P= 0.015);组蛋白H3K79 me2的相对表达量分别为1.00±0.05、0.74±0.07 ( t= 16.69, P= 0.018) ;DNA损伤的Olive尾距值分别为1.46±0.28、3.12±0.68 ( t= 15.22, P= 0.018);蛋白p53的相对表达量分别为1.00±0.04、1.24±0.04 ( t= 18.71, P= 0.012);?H2AX的相对表达量分别为1.00±0.03、1.56±0.11 ( t= 8.32, P= 0.045)。 结论 TCE引起L-02细胞组蛋白中H3K79 me2与H3K79 me3修饰水平发生变化,并且诱导DNA损伤,提示TCE可能通过DNA损伤导致H3K79 me2和H3K79 me3甲基化修饰的变化 %K 三氯乙烯 %K 组蛋白类 %K 正常人肝细胞 %K DNA损伤修复 %U http://www.pubhealth.org.cn/cn/wxshow.asp?id=5514