%0 Journal Article
%T 核酸内切酶改良型彗星实验用于检测遗传毒物致DNA氧化损伤
%A 戴宇飞
%A 李红丽
%A 段化伟
%A 牛勇
%A 翟庆峰
%A 赵健
%A 邱玉刚
%A 郑玉新
%J 中国预防医学杂志
%D 2014
%X 目的 建立核酸内切酶改良型体外彗星实验方法，并应用该方法检测DNA氧化损伤。 方法 分别应用苯并[a]芘[B(a)P，20 μmol/L]、甲基磺酸甲酯[MMS，25 μg/ml]、秋水仙素(COL，5 mg/L)和长春新碱(VCR，0.5 mg/L)处理人支气管上皮(16HBE)细胞。采用噻唑蓝(MTT)实验评估细胞生存率，常规彗星实验和内切酶改良型彗星实验分别检测DNA损伤和氧化损伤，流式细胞术检测细胞内活性氧改变。 结果 MTT实验显示，B(a) P、MMS、COL、VCR染毒后可引起较高水平的细胞内活性氧升高，4个组的细胞生存率分别为：(59.69±2.60)%、(54.33±2.81)%、(53.11±4.00)%、(51.43±3.92)%。常规彗星实验及甲酰胺嘧啶-DNA-糖基化(formamidopyrimidine-DNA-glycosylase，FPG)酶彗星实验均检测到B(a)P、MMS、COL、VCR引发的DNA损伤。FPG酶彗星实验中，Olive尾矩改变最明显，缓冲液组的B(a) P、MMS、COL、VCR组Olive尾矩分别为22.99±17.33、31.65±18.86、19.86±9.56和17.02±9.39，FPG酶处理后Olive尾矩分别为34.50±17.29、43.80±10.06、33.10±12.38和28.60±10.53，较缓冲液组分别增加58.94%、38.48%、66.86%和68.21% ( t 值分别为3.91、3.89、6.66和3.87， P 值均<0.05)。相关性分析显示，Olive尾矩与细胞内活性氧也有较好的相关性( r ＝0.77， P <0.05)。 结论 FPG酶改良型彗星实验可以有效的检测遗传毒物所致的DNA氧化损伤改变
%K 诱变剂
%K DNA
%K 核酸内切酶
%K 氧化损伤
%K 彗星实验
%U http://www.pubhealth.org.cn/cn/wxshow.asp?id=4112