%0 Journal Article %T 抑制剂去除对冷冻草莓中诺如病毒RT-PCR检测的影响 %A 岳志芹 %A 徐文斐 %A 房保海 %A 林超 %A 梁成珠 %A 王宫璞 %A 王群 %A 郑小龙 %J 食品科学 %D 2017 %X 目的:设计对比实验,以冷冻草莓为材料,研究样品中所含抑制剂对诺如病毒荧光定量逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测结果的影响,优化提高检测灵敏度与准确率。方法:GⅡ型诺如病毒便悬液的制备与RNA提取,已知阴性冷冻草莓样品进行前处理、病毒富集、病毒RNA提取纯化,分组(对照组、实验组),抑制剂去除,荧光定量RT-PCR检测。结果:随着病毒浓度的梯度递减,抑制剂影响作用呈明显增强趋势,导致在高于正常检测最低限度两个数量级的水平,即出现假阴性结果;抑制剂去除的实验组检测结果,随着病毒浓度梯度的递减明显优于未经处理的对照组;抑制剂去除的实验组稳定检出限为10-6(Ct值小于40),最低检出限为10-7(诺如病毒(norovirus,NoV)浓度梯度检测最低检出限为10-5)。结论:抑制剂去除可明显优化冷冻草莓中NoV荧光定量RT-PCR检测,提高检测方法的灵敏度,且操作简便快捷,检测成本浮动不大,期望应用于日常检测工作中 %K 冷冻草莓 %K 诺如病毒 %K 荧光定量RT-PCR %K 抑制剂 %U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract40862.shtml