%0 Journal Article %T 基于CRISPR-Cas9系统的Saccharomyces cerevisiae基因删除 %A 冯惠勇 %A 刘金雷 %A 李天明 %A 李子怡 %A 杨天勇 %A 牛潇迪 %A null %J 食品科学 %D 2019 %X 建立CRISPR-Cas9介导的在Saccharomyces cerevisiae双倍体细胞中进行基因敲除的方法。以can1基因敲除后的表型验证该CRISPR-Cas9系统的有效性,can1基因的失活效率达到4%。利用该系统又分别敲除了pdc、adh3、adh2、adh1、 pdh等基因,单基因编辑效率分别为4/48、3/48、1/48、3/28、1/16。确定了基因连续敲除的方法流程,pdc、adh3、adh2三个基因全部敲除,整个过程用时17 d。探索了双基因一次转化同时敲除的方法,将adh5、lip两个基因同时敲除用时6 d,基因编辑效率分别为9/32和10/32 %K 酿酒酵母 %K CRISPR-Cas9 %K 基因组工程 %K 基因敲除 %U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract47840.shtml