%0 Journal Article %T 双抗夹心ELISA检测转Bar基因抗除草剂大豆 %A 尤晴 %A 张春雨 %A 张淋淋 %A 李启云 %A 李小宇 %A 王永志 %A 董英山 %A 郭东全 %A null %J 食品科学 %D 2016 %X 为快捷有效地检测转Bar基因抗除草剂大豆,利用已制备的抗除草剂Bar基因编码蛋白,膦丝菌素乙酰转移酶(phosphinothricin acetyltransferase,PAT)单克隆抗体和多克隆抗体,建立PAT蛋白双抗夹心酶联免疫吸附检测方法,对转Bar基因抗除草剂大豆不同组织材料进行定量检测。结果显示,最佳检测条件为捕获抗体质量浓度0.125 μg/mL,包被酶标板,37 ℃孵育1 h后4 ℃静置过夜,检测样品37 ℃孵育1.5 h,检测抗体质量浓度6.25 μg/mL,37 ℃孵育1.5 h;PAT蛋白的最低检测限为0.04 ng/mL,大豆蛋白体系中为8 ng/mL;重复性变异系数小于3%。利用上述检测条件,对实验建立的转Bar基因抗除草剂大豆进行PAT蛋白定量检测,成功地在根、茎、花、叶、种子不同部位检测到该蛋白的表达 %K Bar %K 双抗夹心酶联免疫吸附 %K 大豆 %K 检测 %U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract38227.shtml