%0 Journal Article
%T 嗜酸乳杆菌ATCC4356分选酶A基因克隆、表达及功能分析
%A 吴京
%A 吴振
%A 曾小群
%A 潘道东
%A 熊蓉露
%A 王文文
%A 郭宇星
%A null
%J 食品科学
%D 2018
%X 分选酶在细菌对宿主细胞的黏附过程中具有重要作用。为探究乳酸菌分选酶的特性及与其他致病菌分选酶的差异，以嗜酸乳杆菌ATCC4356为模板，构建分选酶A（sortase A，SrtA）重组表达载体pET28a-SrtAΔN48，转入大肠杆菌感受态细胞Transetta（DE3）内表达，使用Dabcyl-QALPTTGEE（Edans）探究其酶活特性。结果发现：嗜酸乳杆菌ATCC4356 SrtA（Lap-SrtAΔN48）分子质量为20kDa左右；Mg2＋、Zn2＋、Mn2＋可提高Lap-SrtAΔN48的转肽能力；Ca2＋不会影响SrtAΔN48的活性，明显区别于致病菌；且分选酶抑制剂查尔酮会抑制Lap-SrtAΔN48的活性。进一步通过蛋白质同源建模分析发现Lap-SrtA由8条中心β桶状结构互相折叠而成，属于经典的分选酶结构，Lap-SrtA的活性位点为His137、Cys198、Arg205
%K 嗜酸乳杆菌
%K 分选酶A
%K 基因克隆
%K 酶学特性
%K 结构特性
%U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract43552.shtml