%0 Journal Article
%T 弧菌外膜蛋白Ompk基因序列分析及其多克隆抗体的制备
%A 丁承超
%A 刘箐
%A 曾海娟
%A 谢曼曼
%J 食品科学
%D 2016
%X 弧菌外膜蛋白（outer membrane protein，OMP）OmpK不仅可激发机体的体液免疫和细胞免疫，而且可在不同血清型菌株之间产生免疫交叉反应。本研究利用克隆测序和查找GenBank获得20 株弧菌的Ompk基因序列并构建Ompk系统进化树，对比分析20 株弧菌Ompk基因序列；利用原核表达系统表达野生株Vibrio parahaemolyticus B的OmpK，纯化OmpK后制备兔多克隆抗体；采用酶联免疫吸附分析法和蛋白质印迹法（Western-blotting）分别检测抗体效价和特异性。系统进化树和基因序列比对结果显示Ompk基因在弧菌中高度保守，核苷酸序列相似性在77%以上；原核表达系统成功表达了弧菌OmpK，蛋白经纯化后成功制备的兔多抗效价达1∶16 000；Western-blotting实验证实抗体具有很好的特异性；OmpK多克隆抗体在弧菌中普遍存在免疫交叉性。因此，弧菌Ompk基因序列分析及其抗体研制，不仅为弧菌快速免疫学检测提供可能性，也为以OmpK为靶点的水产疫苗研制奠定了基础
%K 弧菌
%K Ompk
%K 原核表达
%K 纯化
%K 多克隆抗体
%K 免疫学检测
%U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract40272.shtml