%0 Journal Article %T 单增李斯特菌prfA基因缺失菌株的构建及其 生物学特性鉴定 %A 丁承超 %A 刘武康 %A 刘箐 %A 王淑娟 %A 罗勤 %A 谢曼曼 %A 郭亮 %A 陈国薇 %J 食品科学 %D 2017 %X 单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)是一种风险较高的食源性致病菌,其绝大多数毒 力基因的表达均受到由prfA基因编码的PrfA(positive regulatory factor A)蛋白全部或部分调控。使用同源重组的方 法敲除Lm野生菌株EGDe的prfA基因,并通过测定生长曲线、毒力基因表达和侵袭Caco-2细胞能力等探讨单缺失菌 株EGDe-ΔprfA生物学特性。通过测定生长曲线显示prfA敲除株和野生型EGDe二者生长状态无差异;运用实时定量 荧光聚合酶链式反应检测EGDe-ΔprfA的主要毒力基因表达,结果显示plcA、plcB毒力基因的表达量分别上升至原来 的2.5 倍和2 倍,inlA、inlB、inlC、actA、vip等均呈下降趋势,prfA基因表达量趋向于零;侵袭Caco-2细胞结果显示 EGDe-ΔprfA侵袭数为野生株的1/5。该基因缺失菌株的构建及生物学特性研究对食源性致病菌EGDe致病机理研究具 有重要意义并且提供了重要材料 %K 单核细胞增生性李斯特菌 %K prfA %K 基因敲除 %K 生物学特性 %U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract41720.shtml