%0 Journal Article %T Nisin抗性菌株的筛选及Nisin抗性基因的克隆 %A 万谦 %A 吴兴泉 %A 张洁琼 %A 曹健 %A 李艳芳 %A 田广兰 %A null %J 食品科学 %D 2011 %X 利用乳酸链球菌肽(Nisin)抗性基因常与乳糖利用基因位于同一质粒上这一特性,在含300IU/mL Nisin和质量浓度为0.004g/100mL溴甲酚紫的选择性培养基上,从新鲜牛奶中初筛到5株Nisin抗性菌株。经脱脂乳培养基培养、革兰氏染色和镜检,初步确定为乳球菌。分别以5株抗性菌株的基因组和质粒DNA为模板,采用PCR对其Nisin抗性基因(NSR)保守序列进行了扩增,从其中3株抗性菌株(分别命名为N1、N2、N3)的质粒DNA上得到大小约400bp的目的基因产物。经16S rDNA鉴定,进一步确定3株抗性菌株均为乳酸乳球菌。分别以N1、N2、N3的质粒为模板,采用PCR扩增其全长NSR基因,均得到大小约1000bp的目的产物。将从N1得到的NSR基因全长产物与pMD-19T进行连接测序,结果显示,其与已发表序列的相似性达99%,可确定其为NSR基因,且位于抗性菌株N1的质粒上 %K nisin抗性基因(NSR) %K nisin抗性菌株 %K 克隆 %K 筛选 %U http://www.spkx.net.cn/CN/abstract/abstract44381.shtml